ELISA试剂盒样本的大致处理方法

一、液体样本
ELISA试剂盒液体样本处理准则：一切的液体样本，用无菌管搜集，2-8℃条件离心20分钟左右（2000-3000转/分），假如今后碰到其他的液体样本，也按这个办法，归入汇总表。
1、血清：用无菌管搜集，室温血液天然凝结10-20分钟，2-8℃条件离心20分钟左右（2000-3000转/分），细心搜集上清，保存过程中如出现沉积，应再次离心。
2、血浆：应根据标本的要求挑选EDTA、肝素钠或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，2-8℃条件离心20分钟左右（2000-3000转/分），细心搜集上清，保存过程中如有沉积构成，应该再次离心。
3、尿液：用无菌管搜集，2-8℃条件离心20分钟左右（2000-3000转/分）。细心搜集上清，保存过程中如有沉积构成，应再次离心。
4、胸腹水：用无菌管搜集，2-8℃条件离心20分钟左右（2000-3000转/分），细心搜集上清，保存过程中如有沉积构成，应再次离心。
5、脑脊液：用无菌管搜集，2-8℃条件离心20分钟左右（2000-3000转/分），细心搜集上清，保存过程中如有沉积构成，应再次离心。
6、唾液：用无菌管搜集，2-8℃条件离心20分钟左右（2000-3000转/分），细心搜集上清，保存过程中如有沉积构成，应再次离心。
7、细胞培育上清：检测排泄性的成份时，用无菌管搜集。2-8℃条件离心20分钟左右（2000-3000转/分），细心搜集上清，保存过程中如有沉积构成，应再次离心。
8、牛奶：用无菌管搜集，2-8℃条件离心20分钟左右（2000-3000转/分），细心搜集上清，保存过程中如有沉积构成，应再次离心。
9、蜂蜜：用无菌管搜集，2-8℃条件离心20分钟左右（2000-3000转/分），细心搜集上清，保存过程中如有沉积构成，应再次离心。
10、全血：用含有抗凝剂的无菌管搜集，当即悄悄摇动，来回悄悄倒置数次，使血液和抗凝剂混匀，以防血液凝结。
二、ELISA试剂盒固体样本
固体样本处理准则：称取1g的固体样本，用9g的适宜缓冲液溶解，排泄蛋白可以直接离心取上清检测，细胞内的蛋白，要先搜集细胞，再用适宜办法破碎，离心取上清测验。
1、安排标本：切开标本后，称取1g安排，参加9g的pH7.2-7.4左右的PBS，用手艺或匀浆器将标本匀浆充沛。离心20分钟左右（2000-3000转/分），细心搜集上清。分装一份待检测，其他冷冻备用，保存过程中如有沉积构成，应再次离心。关于植物安排，欠好匀浆的话，就在液氮中充沛研磨；
2、细胞内蛋白样本
许多待测蛋白不是排泄蛋白，而是存在于细胞内的蛋白，这个时候，要先搜集细胞，洗刷洁净，再破碎细胞，离心取上清。
（1）培育的细胞
A、动物细胞：用PH7.2-7.4的PBS稀释细胞悬液，使细胞浓度到达100万/ml左右。经过重复冻融（假如重复冻融，破碎作用欠好，就选用超声波破碎），以使细胞损坏并放出细胞内成份。2-8℃条件离心20分钟左右（2000-3000转/分），细心搜集上清，保存过程中如有沉积构成，应再次离心。
B、植物细胞：用PH7.2-7.4的PBS稀释细胞悬液，使细胞浓度到达100万/ml左右，置于冰盒上，用超声破碎仪，设置破碎2s，冷却30s的办法，充沛破碎细胞，以使细胞损坏并放出细胞内成份。2-8℃条件离心20分钟左右（2000-3000转/分），细心搜集上清，保存过程中如有沉积构成，应再次离心。
（2）安排的细胞
切开标本后，称取1g安排，参加9g的pH7.2-7.4左右的PBS，用手艺或匀浆器将标本匀浆充沛。2-8℃条件离心20分钟左右（2000-3000转/分），去除上清，再用pH7.2-7.4左右的PBS当心洗刷沉积的细胞三遍。再用上述的细胞破碎办法破碎细胞。
3、土壤：称取1g土壤，参加9g的pH7.2-7.4左右的PBS，用手艺将标本充沛混匀。2-8℃条件离心20分钟左右（2000-3000转/分），细心搜集上清。分装一份待检测，其他冷冻备用，保存过程中如有沉积构成，应再次离心。假如是测排泄蛋白，直接取上清检测，测验细胞内蛋白，要破碎细胞。
4、咽拭子：参加2g的pH7.2-7.4左右的PBS，溶解咽拭子头部，摇匀，用镊子取出咽拭子并挤干液体，2-8℃条件离心20分钟左右（2000-3000转/分），细心搜集上清。分装一份待检测，其他冷冻备用，保存过程中如有沉积构成，应再次离心。假如是测排泄蛋白，直接取上清检测，测验细胞内蛋白，要破碎细胞。
5.植物标本中相关酶或蛋白的测定：（粗提取）
1、新鲜植物安排请在液氮中充沛研磨；
2、参加样品体积9倍的提取液（pH?7.4?PBS缓冲液）,3、?请于4度，8000rpm，离心30分钟，取上清并暂时保存于4度待用。
三、ELISA试剂盒样本搜集注意事项
1、不能检测含NaN3的样品，因NaN3按捺辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
2、标本收集后赶快进行试验，若不能立刻进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应防止重复冻融。
3、咱们罗列的是通用的样本处理办法，无法包括各种样本，关于一些特别样本，建议试验人员多参阅已宣布的文献，自行设计合理的样本处理办法。