在做细胞培养实验时，大家有时候会碰到这种问题，培养的细胞前期都正常，有时候突然细胞培养基变得浑浊、变黄，而且时间越长，其他的培养瓶中的细胞也会变成这种情况。对于一些新手朋友来讲，可能都不知道细胞到底是怎么被污染的，也不知道该怎么去处理。所以为了尽可能的避免这类事件发生，我们就要时刻保持实验室处于无菌的状态

 

细胞培养实验室应能进行六方面的工作：无菌操作、孵育、制备、清洗、消毒灭菌处理、储藏。

1、无菌操作室无菌操作区只限于细胞培养及其他无菌操作的区域，最好能与外界隔离，不能穿行或受其他干扰。

理想的无菌操作室应划为三部分：

a) 更衣室—―供更换衣服、鞋子及穿戴帽子和口罩。

b) 缓冲间—―位于更衣间与操作间之间，目的是为了保证操作间的无菌环境，同时可放置恒温培养箱及某些必需的小型仪器。

c) 无菌操作间—―专用于无菌操作、细胞培养。其大小要适当，且其顶部不宜过高(不超过2.5m)以保证紫外线的有效灭菌效果;墙壁光滑无死角以便清洁和消毒。　　

工作台安置不应靠墙壁，台面要光滑压塑作表面，漆成白色或灰色以利于解剖组织及酚红显示pH的观察。

无菌操作间的空气消毒：紫外线灯—-产生臭氧，并且室内温度及湿度均较高，不利于工作人员健康。

空气过滤的恒温恒湿装置—-最好。

洁净室(区)空气洁净度级别表洁净度级别：

尘粒最大允许数/立方米 100级 3,500 0 5 110000级

微生物最大允许数 350,000 2,000 100 3100000级

浮游菌/立方米 3,500,000 20,000 50010300000级

沉降菌/皿 10,350,000 60,000 - 15

无臭氧紫外线消毒器电子消毒灭菌器—-在高压电场作用下，电子管的内外电极发生强烈电子轰击，使空气电离而将空气中的氧转换成臭氧。臭氧是一种强氧化剂，能同细菌的胞膜及酶蛋白氢硫基进行氧化分解反应，从而靠臭氧气体弥漫性扩散达到杀菌之目的，消毒时没有死角。消毒后空间的残留臭氧只需30～40min即能自行还原成氧气，空气不留异味，消毒物体表面不留残毒。

2、净化工作台操作简单，安装方便，占用空间小且净化效果很好。

一般细菌培养室使用的净化工作台主要有两种：

a)侧流式或称垂直式

b)外流式或称水平层流式。

净化工作台工作原理大致相同，通常是将室内空气经粗过滤器初滤，由离心风机压入静压箱，再经高效空气过滤器精滤，由此送出的洁净气流以一定的均匀的断面风速通过无菌区，从而形成无尘无菌的高洁净度工作环境。

侧流式工作台：空气净化后的气流由左或右侧通过工作台面流向对侧，也有从上向下或从下向上流向对侧，形成气流屏障保持工作区无菌。工作台结构为封闭式。

外流式(水平式)工作台：净化后的空气面向操作者流动，因而外方气流不致混入操作，但进行有害物质实验操作则对操作者不利。