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Western blotting蛋白定量
人阅读 发布时间:2017-04-25 13:00
Western blotting蛋白定量
收集完蛋白样品后,为确保每个蛋白样品的上样量一致,需要测定每个蛋白样
品的蛋白浓度。
常用蛋白定量试剂盒有BCA蛋白定量试剂盒,微量 BCA 蛋
白定量试剂盒,考马斯亮蓝增强型蛋白定量试剂盒。
考马斯亮蓝增强型蛋白定量操作简便迅速,消耗样品量少,但不同蛋白质之间
差异大,且标准曲线线性差。高浓度的 Tris、EDTA、尿素、甘油、蔗糖、丙酮、
硫酸铵和去污剂可改变测定液的 pH 值,从而影响显色和干扰蛋白质定量。
BCA 蛋白定量操作更简单,试剂及其形成的颜色复合物稳定性更好,几乎没有
干扰物质的影响,灵敏度高(微量检测可达到 0.5 μ g/ml),应用更加灵活。与考
马斯亮蓝增强型蛋白定量法相比,BCA 法的显著优点是不受去垢剂的影响。
收集完蛋白样品后,为确保每个蛋白样品的上样量一致,需要测定每个蛋白样
品的蛋白浓度。
常用蛋白定量试剂盒有BCA蛋白定量试剂盒,微量 BCA 蛋
白定量试剂盒,考马斯亮蓝增强型蛋白定量试剂盒。
考马斯亮蓝增强型蛋白定量操作简便迅速,消耗样品量少,但不同蛋白质之间
差异大,且标准曲线线性差。高浓度的 Tris、EDTA、尿素、甘油、蔗糖、丙酮、
硫酸铵和去污剂可改变测定液的 pH 值,从而影响显色和干扰蛋白质定量。
BCA 蛋白定量操作更简单,试剂及其形成的颜色复合物稳定性更好,几乎没有
干扰物质的影响,灵敏度高(微量检测可达到 0.5 μ g/ml),应用更加灵活。与考
马斯亮蓝增强型蛋白定量法相比,BCA 法的显著优点是不受去垢剂的影响。